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(1)含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位点,其中SmaⅠ酶的切割位点位于抗病基因(目的基因)上;质粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位,所以要构建重组质粒,可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ进行切割,然后再用DNA连接酶连接.
(2)A.使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解,A正确;
B.无论与目的基因重组与否,质粒运载体都能进入宿主细胞,B错误;
C.质粒通常是来自细菌,病毒没有质粒,因此质粒运载体可能是从细菌的DNA改造形成的,C错误;
D.质粒作为运载体,必须有限制酶的切割位点,才能与目的基因整合重组,D正确.
(3)卡那霉素能抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,应使基因表达载体A中含有抗卡那霉素基因,以此作为标记基因.
(4)由导入目的基因的细胞培养成转基因抗病香蕉,采用的是植物组织培养技术.在植物激素的使用过程中,细胞分裂素与生长素的比值低,有利于根的分化.
(5)据图分析,随着培养基中蔗糖浓度的增加,光合作用强度的变化趋势是逐渐减小,单株鲜重的变化趋势是先增加后下降.据图推测,若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力,应降低 培养基中蔗糖浓度,以便提高试管苗的自养能力.
故答案为:
(1)PstI和EcoRI DNA连接
(2)AD
(3)抗卡那霉素基因
(4)植物组织培养 A
(5)逐渐减小 先增加后下降 降低
(1)基因工程的原理是基因重组.
(2)将抗盐基因直接导入烟草细胞,一般情况下,烟草不会具有抗盐特性,原因是抗盐基因在烟草细胞中不能复制,也不能表达,即不能转录和翻译成相应的蛋白质.
(3)质粒和含有目的基因的外源DNA分子上都含有SalI、Hindm、BamHI三种限制酶切割位点,其中BamHI的切割位点位于目的基因上,用该酶切割会破坏目的基因;若只用SalI一种限制酶切割可能会导致目的基因与运载体反向连接;因此在构建重组质粒时,应选用SalI和HindIII两种限制酶对质粒和抗盐基因进行切割,以保证重组DNA序列的唯一性.
(4)用SalI和HindIII两种限制酶对质粒进行切割时,会破会四环素抗性基因,但不会破坏氨苄青霉素抗性基因,因此导入重组质粒的农杆菌能在含有氨苄青霉素的培养基上能生存,但不能在含有四环素培养基上生存,所以培养基A和培养基B分别还含有氨苄青霉素、四环素,含目的基因的是4和6菌落中的细菌.探针是指用放射性同位素标记的目的基因(抗盐基因).除了从分子水平上进行检测,还可以从个体水平上进行鉴定,即用一定浓度的盐水浇灌烟草植株来鉴定烟草的耐盐性.
(5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用采用植物组织培养技术,先经过脱分化形成愈伤组织,愈伤组织再经过增殖和分化形成完整的植株.此过程除营养物质外还必须向培养基中添加植物激素(生长素和细胞分裂素).
故答案为:
(1)基因重组
(2)复制?表达(合成抗盐基因的mRNA)
(3)Sal?I?Hind?III?质粒?抗盐基因的DNA
(4)氨苄青霉素? 四环素(氨苄青霉素和四环素)? 4和6?抗盐基因 一定浓度的盐水浇灌烟草植株(将烟草植株移栽到盐碱地中)
(5)植物组织培养?细胞增殖和分化?植物激素(生长素和细胞分裂素)
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我是百姓号的签约作者“易秋”
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